Definición (para embriología): 

Conciste en la producción de individuos genéticamente idénticos.

Se realiza el clonado a partir de la inoculación de células de embriones en ovocitos maduros.

Los núcleos se sacan de un embrión de 34 a 64 células. Otra alternativa es retirar núcleos mediante microcirugía del macizo celular interno del blastocisto o usar células somáticas (que son más y que se pueden sacar de órganos especializados, como en el caso de la oveja Dolly que se sacaron de la ubre).

El proceso de clonado lleva dos procesos paralelos: Por un lado tenemos un embrión con blastómeras, y por el otro, ovocitos maduros.

Con una micropipeta (con punta biselada para poder perforar la membrana pelúcida) se enuclea el ovocito, se extrae toda la porción cercana al cuerpo polar (se extrae alrededor de 1/3 del citoplasma del óvulo, porque esto me garantiza un 70% de enucleación).

Es esencial que el laboratorio tenga la técnica de fertilización in vitro. 

Se digiere la zona pelúcida del embrión con hialuronidasa.

Luego, para desagregar las células, se utiliza PBS sin calcio, fósforo ni magnesio. Esto produce una hipoosmosis que hace que las células se separen. Cuando tenemos las blastómeras separadas, tomamos los blastómeros (20 micrómetros de diámetro) y los colocamos en los ovocitos enucleados, entre la zona pelúcida y el citoplasma del óvulo.

Estos complejos aislados se llaman complejo ovocito-célula. Este complejo debe pasar por un campo eléctrico. El aparato llamado electrofusor de células, tiene 2 polos separados en medio mm. En esa separación se colocan los complejos (unos 10 por vez). Se coloca un solo blastómero en el ovocito. Enucleamos el ovocito porque este es haploide. Cuando coloco el blastómero, se produce la fusión: se producen poros en las membranas del blastómero y del citoplasma del ovocito.

Equipo de fusión celular: es un equipo muy caro.

Luego que se fusiona, se pasa a un cultivo como con los otros embriones, en gotitas con medio carbonatado con albúmina o suero. Se controla durante 7 días. A las 2 horas ya se observa si hubo o no fusión.

Los que fusionaron se colocan en gotitas o aceite mineral, en cultivo de control durante 7 u 8 días. Luego, si todo salió bien, se congelan o se transfieren o se dividen.

Texto: Gissel Escudero